由于液相色譜儀器柱效是柱內(nèi)流動(dòng)相線性流速的函數(shù),因此使用不同的流速可以獲得不同的柱效。為了追求給定色譜柱的最佳效率,最好使用最佳流速。對(duì)于內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱,流速一般為1ml/min。對(duì)于內(nèi)徑為4.0mm的色譜柱,流速優(yōu)選為0.8ml/min。
選擇最佳流速時(shí),可以延長(zhǎng)分析時(shí)間。液相色譜儀器廠家可以采用改變色譜柱流動(dòng)相洗滌強(qiáng)度的方法來(lái)縮短分析時(shí)間。例如,使用反相柱時(shí),可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量。
A.由于甲醇價(jià)格便宜,反相柱推薦使用甲醇系統(tǒng)(必須使用乙腈時(shí)除外):相柱。
B.推薦使用沸程為30-60℃的石油醚或純化的己烷作為正相柱的流動(dòng)相。不應(yīng)使用未純化的己烷。水最好使用超純水(電阻率大于 18 兆歐)。去離子水和雙蒸水含有酚類雜質(zhì),可能會(huì)影響分析結(jié)果。
C.水性液相色譜柱的流動(dòng)相應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備好,特別是在夏季,使用緩沖溶液作為流動(dòng)相時(shí),不要隔夜使用。最好加入疊氮化鈉以防止細(xì)菌生長(zhǎng)。
D.色譜柱流動(dòng)相需用0.45 μm濾膜過(guò)濾,去除顆粒雜質(zhì)。
E.使用 HPLC 級(jí)溶劑制備流動(dòng)相。使用合適的流動(dòng)相可以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命,提高色譜柱的性能。