今天,帝創(chuàng)色譜儀器廠家教大家液相色譜儀器操作步驟及主要事項!
一、液相色譜儀主要操作步驟:
1.過濾流動相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜。
2.對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3.打開HPLC工作站(包括計算機(jī)軟件和色譜儀),連接好流動相管道,連接檢測系統(tǒng)。
4.進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,點擊manual,進(jìn)入手動菜單。
5.有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥,需要在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,沖洗時速度不要超過10 ml/min。 6.調(diào)節(jié)流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。點擊injure,選用合適的流速,點擊on,走基線,觀察基線的情況。
7.設(shè)計走樣方法。點擊file,選取select users and methods,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點擊new method。選取需要的配件,包括進(jìn)樣閥,泵,檢測器等,根據(jù)需要而不同。選完后,點擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括:a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,一般2-5分鐘;b.基線歸零;c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換;d.走樣時間,隨不同的樣品而不同。
8.進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法,點擊start。進(jìn)樣,所有的樣品均需過濾。方法走完后,點擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。
9.關(guān)機(jī)時,先關(guān)計算機(jī),再關(guān)液相色譜。
10.填寫登記本,由負(fù)責(zé)人簽字。
二、液相色譜儀注意事項:
1.流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。
2.柱子是非常脆弱的,*次做的方法,先不要讓液體過柱子。
3.所有過柱子的液體均需嚴(yán)格的過濾。
4.壓力不能太大,不要超過2000 psi
5.選擇高品質(zhì)的柱子,并注意使用方法;可以延長柱子的使用壽命。一般認(rèn)為同一廠牌、同一型號的柱子之間的品質(zhì)都相同,對品質(zhì)管理很嚴(yán)格的廠家而言,這說法是成立的。但如果廠家品質(zhì)管理不夠嚴(yán)格,即使是同一批號的新柱子之間的品質(zhì)也有差異。所以,選用柱子時必須選擇管理嚴(yán)格的高品質(zhì)柱子,我們知道,任何柱子使用過后都會產(chǎn)生變化。尤其如在強(qiáng)酸或強(qiáng)堿條件下使用,柱子更易產(chǎn)生變化。因此,應(yīng)盡量選用pH適用范圍大的柱子。在開發(fā)新分析方法時,許多專家建議不要使用舊柱子。因柱子一經(jīng)使用。柱性會改變;如此一來,使用舊柱子開發(fā)出來的新分析方法,很可能在再使用同廠牌的新柱子分析時。發(fā)生無法達(dá)到預(yù)定效果的情況。